基础医学论文_小鼠骨髓浆细胞样与髓样树突状细
文章目录
1 材料与方法
1.1 动物与材料:
1.2 实验方法
1.2.1 mDC与pDC的培养和分选:
1.2.2 DC负载Lewis肺癌细胞裂解物与DC形态观察:
1.2.3 混合淋巴细胞增殖实验:
1.2.4 免疫表型及细胞因子的检测:
1.3 采用SPSS22.0软件包进行数据处理及分析。
2 结果
2.1 mDC与pDC细胞的分选时间:
2.2 负载肿瘤细胞裂解物的mDC组细胞较pDC组分泌更多的细胞因子:
2.3 负载肿瘤细胞裂解物的mDC组细胞刺激淋巴细胞增殖能力较pDC组高:
2.4 负载肿瘤细胞裂解物mDC与pDC的镜下形态:
2.5 负载细胞裂解物的mDC与pDC组的免疫表型表达上调:
3 讨论
文章摘要:目的:建立小鼠骨髓浆细胞样与髓样树突状细胞亚群的体外培养、分离及鉴定的方法,探讨小鼠骨髓树突状细胞亚群间生物学功能的差异。方法:获取C57BL/6小鼠骨髓细胞,利用重组小鼠fms样酪氨酸激酶受体3配体(rmFlt3-L)诱导其向pDC及mDC亚群分化,并利用流式细胞仪及磁珠抗体对小鼠骨髓DC亚群进行分离与鉴定,计算不同时间点细胞数量及mDC与pDC的占比,确定最佳分选时间,然后将Lewis肺癌细胞裂解物分别刺激mDC及pDC,观察DC细胞形态、利用流式细胞仪检测各组免疫表型分子的变化、ELISA法检测细胞因子的分泌情况及CCK-8法检测淋巴细胞的增殖情况。结果:小鼠骨髓细胞经rmFlt3-L体外诱导培养8~9d,可获得表型为CD11c+CD11b-B220+pDC与CD11c+CD11b+B220-mDC。功能方面,在负载Lewis肺癌细胞裂解物条件下,mDC组分泌的IL-12及TNF-α均高于pDC组(P<0.05);mDC组刺激淋巴细胞增殖的能力均高于pDC组(P<0.05)。形态上,mDC体积较大,细胞核不规则,且细胞周边见较多的"突起";而pDC体积较小,呈类圆形,大部分细胞表面无"突起"。免疫表型方面,负载Lewis肺癌细胞裂解物的mDC组细胞表面CD80、CD86、CD40及MHC-Ⅱ类分子平均荧光强度值高于pDC组。结论:小鼠骨髓细胞在rmFlt3-L的刺激诱导下分化成pDC与mDC亚群,负载肿瘤细胞裂解物的mDC的生物学功能强于pDC,可能与mDC的形态成熟与共刺激分子表达上调相关。
文章关键词:
论文分类号:R-33
文章来源:《中国病原生物学杂志》 网址: http://www.zgbyswxzz.cn/qikandaodu/2021/1029/919.html