农作物论文_过表达野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成
文章目录
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.2 GsSAMS基因的植物超量表达载体构建
1.3 GsSAMS对水稻的遗传转化
1.4 抗性植株分子生物学检测
1.5 水稻幼苗期耐盐碱性分析
1.6 盐碱胁迫下抗氧化酶活性测定
1.7 盐碱胁迫相关基因表达水平检测
2 结果与分析
2.1 GsSAMS基因植物超量表达载体构建
2.2 水稻遗传转化及抗性植株分子生物学检测
2.3 GsSAMS转基因水稻耐盐碱性分析
2.4 GsSAMS转基因水稻抗氧化物酶活性分析
2.5 GsSAMS转基因水稻盐碱胁迫相关基因表达分析
3 讨论
4 结论
文章摘要:S-腺苷甲硫氨酸合成酶(SAMS)是生化反应中合成甲基供体的关键酶,在植物逆境响应中具有重要的作用。为了鉴定野生大豆S-腺苷甲硫氨酸合成酶GsSAMS基因对水稻盐碱胁迫耐性的影响,本研究采用USER克隆技术构建植物过表达载体,以农杆菌介导法侵染水稻愈伤组织,经过PCR、半定量PCR(RT-PCR)等分子检测获得GsSAMS转基因水稻株系;通过对比野生型和转基因水稻盐碱胁迫处理后的表型、存活率及过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性等指标,发现GsSAMS转基因株系耐盐碱性显著优于野生型。通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析发现盐碱胁迫处理后,OsM6PR1、OsNAC5、OsPOX1基因在转基因株系中的表达显著高于野生型,说明GsSAMS可通过提高抗氧化物酶POD和CAT活性及相关基因的表达,增强转基因水稻盐碱胁迫耐受性。本研究获得的耐盐碱水稻新株系对盐碱地的开发利用具有重要意义。
文章关键词:
项目基金:文章来源:《中国病原生物学杂志》 网址: http://www.zgbyswxzz.cn/qikandaodu/2021/1212/1006.html